高效液相色谱法是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。但是作为一个相对复杂的仪器，在使用过程中你是不是遇到了关于HPLC的各种恼人的问题？以下内容或许能帮到您。01 压力异常

（一）无压力显示、无流动相流动

1. 泵未启动

解决方法：

①设置适合的泵流量

②溶剂管理器中设置充足的溶剂余量。

2. 工作站未正常连接

仪器指示灯常亮

（1）网线/USB线异常

解决方法：更换网线/USB线

（2）工作站端口未设置

解决方法：设置工作站端口

（3）电脑IP与工作站IP冲突

解决方法：修改电脑IP

仪器状态灯闪烁

（1）CAN线连接异常

解决方法：重新拔插一下CAN线

（2）通讯板灯异常

解决方法：更换通讯板

3. 柱塞杆折断

解决方法：更换柱塞杆

4. 泵头内有空气

解决方法：

①溶剂脱气

②打开旁路放空阀5mL/min高流量放空。

5. 流动相不足

解决方法：补充流动相

6. 过滤沉子堵塞

解决方法：更换过滤沉子

7. 单向阀损坏

解决方法：更换单向阀

8. 漏液

解决方法：拧紧或更换相应漏液部件。

（二）流动相流动正常但没有压力显示

旁路放空阀组件损坏

解决方法：更换旁路放空阀组件

（三）压力持续偏高/不断升高

1. 保护柱阻塞

解决方法：清洗或更换保护柱

2. 流速设定过高

解决方法：调整流速设定

3. 柱前筛板堵塞

解决方法：

①在允许情况下反冲色谱柱

②更换筛板

③更换色谱柱

4. 流动相使用不当或缓冲盐结晶沉淀

解决方法：

①使用恰当的流动相

②冲洗色谱柱

5. 色谱柱选择不当

解决方法：选择恰当的色谱柱

6. 进样阀损坏

解决方法：清洗或更换进样阀

7. 柱温过低

解决方法：提高柱温

8. 工作站失常

解决方法：

①工作站问题。更换工作站

②电脑版本和工作站冲突。更换推荐配置的电脑。

9. 在线过滤器阻塞

解决方法：清洗或更换在线过滤器

（四）压力持续偏低/不断下降

1. 系统漏液

解决方法：确定漏液位置并维修

2. 流速设定过低

解决方法：调整流速

3. 色谱柱选择不当

解决方法：选择适合的色谱柱

4. 柱温过高

解决方法：降低温度

5. 控制器失常

解决方法：维修或更换控制器

6. 工作站失常

解决方法：

①更换工作站

②电脑版本与工作站冲突，更换推荐配置的电脑

（五）压力波动

1. 泵中有气体

解决方法

①溶剂脱气

②除去泵中气体

2. 单向阀损坏

解决方法：更换单向阀

3. 泵密封损坏

解决方法：更换密封圈

4. 脱气不充分

解决方法：

①溶剂脱气

②改变脱气方法（使用在线脱气法等）

5. 系统漏液

解决方法:确定漏液位置并维修

6. 使用梯度洗脱，由于流动相粘度的变化引起的压力波动。02漏液

（一）接头处漏液

1. 接头问题

解决方法：

①接头的松紧应适当，不宜过松或者过紧。

②接头污染应拆下清洗或者更换

2. 接头处连接管未正常连接

解决方法：

①拧松接头，先将连接管固定或压到底，再拧紧接头

②韧环或连接管发生不可恢复的变形引起的漏液，更换韧环或连接管路。

3. 部件不匹配

解决方法：使用同一品牌的配件

（二）泵漏液

1. 单向阀松动

解决方法：

①拧紧单向阀（不必拧的过紧）

②更换单向阀

2. 接头松动

解决方法：将接头拧到合适的程度。

3. 泵密封损坏

解决方法：维修更换密封圈。

4. 旁路放空阀组件损坏

解决方法：

①拧紧旁路放空阀

②维修或更换旁路放空阀

5. 比例阀损坏

解决方法：

①检查隔膜，如果漏液立即更换

②更换垫片

（三）检测器漏液

1. 流通池垫片损坏

解决方法：

①避免过大的背景压力（压力降低）

②更换垫片

2. 流通池破碎

解决方法：更换窗口

3. 手紧接头漏液

解决方法：拧紧或更换

4. 废液管堵塞

解决方法：更换废液管

5. 流通池堵塞

解决方法：重新安装或更换当仪器的CAN线都已经正常连接，且仪器处于打开状态，通讯板上的指示灯处于闪烁的状态。若通讯板上的指示灯不亮或常亮，为通讯板异常。通讯板的指示灯不亮，可能是通讯板未接通电源。检查仪器是否开机，CAN线是否有松动情况。若通讯板常亮，为通讯板异常，更换通讯板。

若输液泵中存在大量的气泡或新仪器安装时，使流动相充满溶剂瓶到输液泵的管路，并检查泵上各个接头处，确保仪器未漏液。然后将旁路放空阀上接到进样器的管路卸下，用堵头堵住。打开旁路放空阀，5mL/min的流量冲洗并隔个1分钟左右，将旁路防空阀旋紧2～3s观察工作站中的压力显示，压力不得超过25MPa，然后迅速旋松，不断循环此操作5分钟。将旁路放空阀到进样器的管路连接好，观察输液泵是否正常吸液或压力波动是否好转，若现象有好转，但仍然压力波动较大，则重复此操作至压力平稳。